上海益启生物科技有限公司
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张经理
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上海 闵行区
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试剂、原辅料包材、细胞库 / 细胞培养、实验室仪器 / 设备、技术服务、耗材、抗体
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突破传统的细胞培养方法，不仅仅是3D细胞培养
人阅读 发布时间：2021-08-27 10:45
我们先来看看传统细胞培养常碰到的问题：
CO2培养箱静态培养
1.培养体系较大，静态培养
2.代谢废物与培养细胞共处一室，细胞状态均为非完全健康状态，数据可信度低
3.细胞传代，细胞换液，消化，固定，染色，给药刺激等实验步骤繁琐
传统的细胞培养图像数据获取
CO2培养箱中取出，放置于镜检平台，短时间记录数据，再放回置培养箱中。
1.终点法记录图像数据
2.应实验目的，不同给药时间/条件，需反复取出/放回培养箱，易污染，核心是人为无法判断与记录最为关键的图像记录周期，容易遗漏记录和还原大量真实生物学事件和现象。
如何在体外条件下突破传统静态和大空间活细胞培养方法的限制，建立密闭空间更为精确的水平呢？
看看我们构建的仿生学细胞培养：
利用“load-and-go”微流控培养板，只需几分钟就可以轻松获取数据。软件实现全程自动化操作，实验步骤简单易行。
2-5 压力驱动的独立液流上样入口
6 细胞上样入口
7-8 废液排出口
●微流控培养板预处理：从6号上样孔中吸去PBS并加入10μl细胞悬浮液，细胞将通过微毛细管自动进入培养室中。
●根据实验设计分别在2-5号上样孔中加入实验所需的试剂或培养基。
●将微流控培养板与控件板对齐封好，打开真空泵及灌流控制系统，当“sealed”灯变绿时表示体系就绪。
●将封好的培养板放置在倒置显微镜载物台上，并将成像区域对准物镜镜头。
特点：
1.仿生学微流控芯片培养板
2.分类设计：哺乳动物细胞/酵母/细菌/藻类等培养板
3.长时间持续观察记录
4.自动化平衡供给温度，湿度，气体
5.一键程序化设置并执行培养条件
6.微生物实现精准单层培养和增殖，更易于荧光染色实验进行定性定量分析
7.单块培养板多通道多条件完成实验设计，进行差异性分析及筛选优化条件
我们看下CellASIC® ONIX2与显微镜搭配示意图：
①控制仪：持续灌流；精确调控液流种类、速度、时间等条件；软件设定温度，并自动调节；同时输入过滤气体。
②芯片培养板：适用所有倒置显微镜可快速进行气体交换。
③多重控制面板：密闭系统，实现气体调控；加热器对预混气体加热。
④操控软件：灵活编辑特定的实验顺序；一键启动，全程自动化。
CellASIC ONIX2 适用于多物种/多细胞类型培养/分析：
CellASIC ONIX2 适用于多种实验设计：
下面我们分享CellASIC® ONIX2 微流控细胞芯片分析仪几个实验设计：
01 活细胞凋亡双染实验设计
采用Jurkat cells为实验对象，将Jurkat cells细胞加入到M04T悬浮细胞培养板上，使用BioTracker NucView®488 绿色染料和Annexin V Texas 红色染料在完全培养基RPMI-1640中培养2小时；随后加入2.5μg/mL CD-95抗体（实验组）或正常培养基（对照组），持续灌流8小时。利用FITC和Texas-Red滤光片，在放大400倍的条件下，每隔10分钟对细胞进行延时成像。
Video1：双功能免疫细胞凋亡过程
CD-95抗体孵育后3h左右，Jurkat细胞开始凋亡，并开始释放caspase介导的绿色荧光。8h后，Jurkat细胞出现磷脂酰丝氨酸（PS）从脂膜内侧翻向外侧，释放Annexin V介导的红色荧光。双标细胞呈黄色。
02 神经细胞的体外长期培养
大鼠皮层神经元细胞在多聚赖氨酸上的生长状况-典型立体网状结构
03 细胞自噬定量分析检测
细胞自噬分析检测(LentiBrite™ GFP-LC3检测)
●细胞饥饿 + 溶酶体抑制(自噬体的形成)
●加入完全培养基后的恢复过程(溶酶体降解)
●通过图像获取分析数据
04 肌动蛋白的解聚/再聚合研究
●REF52 大鼠胚胎成纤维细胞转染LentiBrite™ GFP-beta-actin蛋白
●正常细胞中加入细胞松弛素D处理，之后去除药物影响并观察肌动蛋白的聚合过程
05 细胞迁移与趋化性研究
传统方法 CellASIC微流控细胞芯片实验室
CellASIC® 微流控芯片实验室将依托全自动化程序，协助你完成细胞上样，新鲜培养基实时灌流，精确给药调控，精确调控培养环境的气体和温度程序，并辅助以倒置显微成像平台，完成细胞微环境下的各种精彩图像数据获取。
拥有了CellASIC微流控芯片实验室，突破传统细胞培养方法，成为细胞培养达人将不再是梦。
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